本书是普通高等教育“十一五”国家级规划教材《生物化学》(第3版)的配套实验教材。全书共分3章,分别为基础理论及技术、单元操作实验、综合性实验,共含25个实验项目。本书的教学目的是使学生具备规范的实验技能、合理的实验设计能力、严谨的数据处理能力和分析及解决问题的能力,同时了解学科前沿技术的发展与应用。本书可作为普通高等学校化学、药学及其他非生物类专业本科及研究生教学用书,也可供教师、研究人员等参考。
《生物化学与基础分子生物学实验》共分3章,分别为基础理论及技术、单元操作实验、综合性实验,共含25个实验项目。
《生物化学与基础分子生物学实验》可作为普通高等学校化学类、药学类及其他非生物类专业本科及研究生教学用书,也可供教师、相关研究人员等参考。
生物化学与分子生物学是生命科学体系中密切相关的两门基础学科。生物化学是分子生物学的基础,分子生物学是生物化学的延伸、发展和深化。近年来,生物化学与分子生物学取得了许多具有重大意义的新突破(新发现和新技术),已经成为现代药学、化学等相关学科创新发展的重要基础和驱动力。
为了适应生命科学与药学、化学等学科的融合发展趋势,与时俱进,我们在前两版的基础上,推出《生物化学》(第三版)。在第三版中,我们融入了更多的分子生物学基础知识(包括新理论、新技术、新方法)。不仅如此,根据教学需要,我院还开设了生物化学与分子生物学实验课程。10多年的实践证明,实验课程的开设,对于加深学生对理论课程内容的理解,提升学生应用生物化学方法和技术研究药学问题的兴趣和能力,是非常有意义的。本书就是在这样的背景下编写的。
我们根据药学、化学及其他非生物类专业本科生的专业知识背景和培养目标、生命科学与药学融合发展趋势、生命科学新突破(新理论、新技术)所引领的实验方法和技术的发展及应用情况,并结合在创新药物发现中的经验与体会,对本书进行了内容编排与撰写。编写本书的主要目的是:
(1)使学生能够掌握规范的实验技能:
(2)使学生能够初步具备生物化学与分子生物学学科所需的科学思维及素养,包括合理的实验设计能力、严谨的数据处理能力和分析及解决问题的能力等;
(3)使学生能够了解学科前沿技术:
(4)在掌握基础实验技能的前提下,使学生具备能够自主设计并开展综合性实验的能力。
在内容编排上,本书延续了《生物化学》教材简练而信息量丰富的特点,重视实验课程内容的理论性(实验原理、实验仪器原理、检测试剂工作原理等)、基础性(实验特性、实验单元操作、生物试样制备、实验仪器和设备使用、实验结果处理技术、实验结果的生物学意义分析等)、综合性(串联式实验)和研究性(与药物化学生物学前沿研究密切相关实验)。加强同类型实验的整合和数据处理分析过程的规范指导,同时也特别强调生命科学新技术和新方法在实验中的应用。
本书将以新形态教材形式出版,配套数字课程资源网站(使用方式见书前说明页),提供重要实验单元的标准操作示范及其他拓展资源,供读者参考学习。
本书第一章由欧田苗编写,第二、三章由欧田苗、毕惠嫦、金晶共同编写,全书由欧田苗修改并定稿。古练权教授对本书进行了审阅,并提出了许多宝贵建议。
由于编者的水平有限,难免存在一些错误和不足之处,我们诚恳地希望得到读者的指正和建议,并欢迎与我们进行交流。
第一章 基础理论及技术
1.1 概述
1.2 通用基本操作
1.3 生物分子的提取、纯化与浓缩
1.4 利用层析技术进行生物分子的纯化与鉴定
1.5 利用电泳技术进行生物分子的分离与分析
1.6 利用光谱技术进行生物分子的分析
1.7 探针技术在生物化学与分子生物学研究中的应用
1.8 抗体技术在生物化学与分子生物学研究中的应用
1.9 聚合酶链反应技术在生物化学与分子生物学研究中的应用
1.10基因工程与基因组编辑在生物化学与分子生物学研究中的应用
1.11 测序技术在生物化学与分子生物学研究中的应用
第二章 单元操作实验
实验一 蛋白质的性质实验
实验二 蛋白质的定量测定
实验三 超氧化物歧化酶活性染色鉴定
实验四 土豆酪氨酸酶的提取及酶活力测定
实验五 酪氨酸酶米氏常数的测定及酶活性的影响因素
实验六 亲和柱层析法分离a-乳清蛋白及其含量测定
实验七 用正交法测定几种因素对酶活性的影响
实验八 凝胶电泳法分析乳酸脱氢酶同工酶
实验九 糖类的性质实验
实验十 香菇多糖的制备与含量测定
实验十一 血清胆固醇的定量测定
实验十二 肌糖原的酵解作用
实验十三 脂肪酸的口β-氧化
实验十四 动物肝组织中总DNA的提取与定量测定
实验十五 动物组织细胞中总RNA的提取与鉴定
实验十六 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)
实验十七 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒的转化
实验十八 质粒DNA的碱裂解法提取及定量分析
实验十九 PCR及酶切鉴定转化产物
实验二十 人基因组DNA多态性分析(PCR-SSCP)
第三章 综合性实验
实验二十一 多肽序列分析
实验二十二 血清中y-球蛋白的分离、纯化与鉴定
实验二十三 血清lgG的SDS-PAGE分离及Western blot鉴定
实验二十四 酶联免疫吸附法一双抗体夹心法测定血清中干扰素水平
实验二十五 端粒酶抑制剂的活性检测
附录
附录一 常用缓冲溶液的配制
附录二 易变质和需特殊方法保存的常用试剂
附录三 核酸和蛋白质的电泳检测